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液相色譜知識

正相色譜柱怎么沖洗

2023-08-25 Vink

正相色譜柱一般使用有機溶劑作為流動(dòng)相,并使用水作為洗脫劑。沖洗正相色譜柱的步驟如下:


1. 首先,使用有機溶劑(如甲醇、乙醇等)進(jìn)行平衡,直到色譜柱的基線(xiàn)穩定。這個(gè)步驟可以去除柱子中的氣泡和空氣。


2. 將待測樣品溶解在合適的有機溶劑中,注入色譜柱??梢允褂米詣?dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)方式進(jìn)行。


3. 調節流動(dòng)相的組成,提供合適的梯度程序。這個(gè)步驟可以根據樣品的特性和分離需求來(lái)確定??梢酝ㄟ^(guò)改變有機溶劑和水的比例,使用線(xiàn)性梯度或者梯度程序來(lái)進(jìn)行分離。


4. 根據樣品的保留行為和分離效果,調整流速和梯度程序,以?xún)?yōu)化分離效果。


5. 當需要沖洗正相色譜柱時(shí),通常使用純水或者低極性的溶劑(如醋酸、甲醇與水的混合物)進(jìn)行洗脫??梢允褂眉兯蛘叩蜆O性溶劑進(jìn)行重復洗脫,直到色譜柱恢復到初始條件。


6. 最后,使用有機溶劑重新平衡柱子,并進(jìn)行下一次分析或保管。


需要注意的是,在沖洗正相色譜柱時(shí),柱子是非常重要的分析工具,因此需要謹慎操作,避免使用過(guò)于極性或非極性的溶劑,以免對柱子造成不可逆的損壞或影響柱子的使用壽命。


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