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液相色譜知識

高效液相色譜柱異常排除

2023-10-09 Vink

當高效液相色譜(HPLC)柱出現異常時(shí),可以采取以下步驟進(jìn)行排除:


1. 檢查壓力是否正常:如果壓力異常,需要檢查泵是否正常工作,包括泵的流量設置、泵頭密封圈是否完好等。同時(shí),檢查連接管路是否有堵塞、漏液等情況。

2. 檢查流動(dòng)相是否正確:流動(dòng)相使用不當或緩沖鹽的結晶沉淀也可能導致雙峰出現。需要確保流動(dòng)相的正確配比和PH值調節,以避免對色譜柱產(chǎn)生不必要的損害。

3. 檢查色譜柱是否平衡:每次運行前要給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱,以避免因色譜柱未平衡而導致的雙峰現象。

4. 檢查流速是否穩定:流速的變化也可能導致保留時(shí)間漂移和雙峰出現。需要確保輸液泵流速穩定,以避免對色譜圖產(chǎn)生影響。

5. 檢查進(jìn)樣過(guò)程是否正常:進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣或樣品組分的吸收低于流動(dòng)相,都可能導致雙峰出現。需要確保在進(jìn)樣過(guò)程中避免空氣進(jìn)入,并選擇合適的樣品組分吸收波長(cháng)。

6. 檢查溫度控制是否適宜:溫控不當可能會(huì )導致保留時(shí)間漂移和雙峰出現。需要確保柱溫箱溫度恒定,以避免對色譜柱產(chǎn)生影響。

7. 檢查過(guò)濾器是否堵塞:如果流動(dòng)相或溶劑中存在雜質(zhì),可能會(huì )導致過(guò)濾器堵塞,從而影響流動(dòng)相的流速和色譜圖的穩定性。需要定期更換過(guò)濾器芯,并使用過(guò)濾后的流動(dòng)相。

8. 檢查單向閥是否損壞:?jiǎn)蜗蜷y損壞可能導致液相色譜出現雙峰。需要更換損壞的單向閥。


總之,當高效液相色譜柱出現異常時(shí),需要從多方面進(jìn)行檢查和排除,以確保液相色譜的正常運行和結果的準確性。


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